在病毒檢測(cè)領(lǐng)域,抗原檢測(cè)試劑盒因其快速、便捷的特點(diǎn),成為一種重要的檢測(cè)手段。與核酸檢測(cè)和抗體檢測(cè)相比,抗原檢測(cè)直接針對(duì)病毒的蛋白質(zhì)成分進(jìn)行檢測(cè),能夠在感染早期快速識(shí)別病毒的存在。然而,實(shí)現(xiàn)高靈敏度和高特異性的抗原檢測(cè)并非易事,這需要從檢測(cè)原理、抗體選擇到技術(shù)優(yōu)化等多方面的綜合考慮。
抗原檢測(cè)的原理與優(yōu)勢(shì)
抗原檢測(cè)的核心在于利用特異性抗體識(shí)別病毒表面的抗原蛋白。例如,AIE研究院推出的基孔肯雅病毒抗原檢測(cè)方案,采用AIE熒光免疫層析法,通過(guò)熒光標(biāo)記的抗體與病毒抗原結(jié)合,形成雙抗體夾心免疫復(fù)合物,從而實(shí)現(xiàn)高靈敏度的檢測(cè)。這種方法無(wú)需等待人體產(chǎn)生抗體,可在病毒血癥高峰時(shí)(發(fā)病0–5天)快速檢出病毒。
與核酸檢測(cè)相比,抗原檢測(cè)無(wú)需復(fù)雜的RNA提取和PCR儀器,操作更為簡(jiǎn)便,成本也更低。這使得抗原檢測(cè)在資源有限的環(huán)境中具有顯著優(yōu)勢(shì),能夠快速篩查大量樣本,及時(shí)發(fā)現(xiàn)感染病例。
提升靈敏度與特異性的關(guān)鍵技術(shù)
1. 抗體的選擇與優(yōu)化
抗原檢測(cè)試劑盒的性能在很大程度上取決于所使用的抗體。高質(zhì)量的配對(duì)抗體能夠顯著提升試劑盒的檢測(cè)性能。理想的配對(duì)抗體應(yīng)具備高親和力、高特異性和良好的穩(wěn)定性。例如,在檢測(cè)新冠病毒時(shí),通過(guò)優(yōu)化抗體配對(duì),可以有效避免高劑量鉤狀效應(yīng),提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
2. 多靶點(diǎn)檢測(cè)策略
為了提高檢測(cè)的靈敏度和特異性,一些研究采用了多靶點(diǎn)檢測(cè)策略。例如,針對(duì)新冠病毒的檢測(cè),通過(guò)同時(shí)檢測(cè)S蛋白和N蛋白兩個(gè)抗原靶點(diǎn),可以顯著提高膠體金免疫層析方法學(xué)的靈敏度。這種雙靶點(diǎn)檢測(cè)方法能夠在低病毒載量的情況下,仍保持較高的檢測(cè)敏感性。
3. 先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)
除了傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)和膠體金法,一些新型檢測(cè)技術(shù)也在不斷涌現(xiàn)。例如,AIE熒光免疫層析法利用聚集誘導(dǎo)發(fā)光技術(shù),能夠?qū)崿F(xiàn)更高的靈敏度和特異性。與傳統(tǒng)方法相比,AIE熒光免疫層析法的靈敏度可達(dá)乳膠法或膠體金法的10倍。
實(shí)際應(yīng)用中的挑戰(zhàn)與展望
盡管抗原檢測(cè)技術(shù)在靈敏度和特異性上取得了顯著進(jìn)展,但在實(shí)際應(yīng)用中仍面臨一些挑戰(zhàn)。例如,不同病毒株的抗原變異可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的差異,這需要不斷更新和優(yōu)化檢測(cè)抗體。此外,抗原檢測(cè)在低病毒載量樣本中的表現(xiàn)仍需進(jìn)一步提升,以確保早期感染的準(zhǔn)確識(shí)別。
未來(lái),隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和更多新型檢測(cè)方法的出現(xiàn),抗原檢測(cè)有望在病毒檢測(cè)中發(fā)揮更大的作用。通過(guò)進(jìn)一步優(yōu)化抗體設(shè)計(jì)、采用多靶點(diǎn)檢測(cè)策略以及引入檢測(cè)技術(shù),抗原檢測(cè)試劑盒將能夠?qū)崿F(xiàn)更高的靈敏度和特異性,為疫情防控和公共衛(wèi)生安全提供更有力的支持。